Лабораторные рекомендации по выявлению инфекции, вызванной вирусом оспы обезьян

23 июля 2022 года Генеральный директор Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) объявил эскалацию глобальной вспышки обезьяньей оспы чрезвычайной ситуацией в области общественного здравоохранения, имеющей международное значение (PHEIC). По данным ВОЗ, в 92 странах/территориях зарегистрировано более 35 000 случаев, а смертей по состоянию на 17 августа. Большинство зарегистрированных случаев (с историей поездок) произошло в регионах Европы и Северной Америки.

Оспа обезьян — редкое заболевание, вызываемое инфицированием вирусом оспы обезьян (MPXV) — вирусом с двунитевой оболочкой, принадлежащим к тому же семейству вирусов, которые вызывают оспу.Этот вирус может передаваться при контакте с биологическими жидкостями, повреждениями на коже или внутренних слизистых оболочках с такими симптомами, как лихорадка, головная и мышечная боль.Инкубационный период оспы обезьян обычно составляет от 6 до 13 дней, но может составлять от 5 до 21 дня (около трех недель).
По данным ВОЗ, лучшие диагностические образцы берутся непосредственно из сыпи — кожи, жидкости или корок или биопсии, если это возможно.Другие методы, такие как обнаружение антигенов и антител, могут оказаться бесполезными, поскольку они не различают ортопоксвирусы.

При работе с образцами от подозреваемых, вероятных или подтвержденных случаев оспы обезьян в лаборатории рекомендуется использовать подход, основанный на оценке риска.Поэтому процедуры выявления присутствия MPXV, отнесенного к возбудителю 3-й группы риска, должны проводиться в лаборатории 2-го уровня биобезопасности с использованием приведенного ниже перечня оборудования.

Руководство по оборудованию для обнаружения вируса оспы обезьян

Хранение образцов и реагентов

Образцы MPXV рекомендуется хранить в холодильнике при температуре от 2°C до 8°C или заморозить (-20°C или ниже) в течение часа после сбора.Если время транспортировки превышает семь дней, образцы следует хранить при температуре -20°C или ниже.Между тем, для длительного хранения образцов (>60 дней с момента сбора) рекомендуется температура -70°C.

Лабораторные холодильники, лабораторные морозильники и морозильники сверхнизкой температуры Biobase оснащены хорошо продуманными холодильными системами и высококачественными материалами, подходящими для хранения чувствительных к температуре биологических образцов, требующих критических условий хранения.

Обработка и подготовка проб

MPXV может передаваться на этапе обработки образцов из-за загрязненного материала или неправильных методов.В связи с этим необходимо соблюдать повышенные меры биобезопасности.Перед инактивацией образцов образцы от пациентов с подозрением на MPXV должны быть подготовлены в функциональном боксе биобезопасности класса II;однако это не требуется для должным образом инактивированных образцов.

Помимо защиты, которую обеспечивают боксы биологической безопасности, боксы биологической безопасности Biobase класса II соответствуют стандартам NSF 49 и EN 12469, обладают удобными для пользователя функциями и покрыты антимикробным порошком на всех внешних и внутренних окрашенных поверхностях для повышения безопасности.Центрифуги необходимы для разделения жидких и твердых компонентов образца.Если это необходимо для процедуры, рекомендуется использовать защитные колпачки или герметичные роторы.

Обнаружение и анализ

Для подтверждения инфекции MPXV проводится тестирование амплификации нуклеиновых кислот (МАНК).Для обнаружения уникальных последовательностей вирусной ДНК используется либо ПЦР в реальном времени, либо традиционная полимеразная цепная реакция (ПЦР).Обнаружение вируса состоит из двух этапов.Первая ПЦР выявляет ортопоксвирусы, но не идентифицирует вид, тогда как вторая ПЦР (или секвенирование) конкретно выявляет MPXV.

Термоциклер для ПЦР в реальном времени обеспечивает эффективную амплификацию нуклеиновых кислот для анализа вирусов.Biobase предлагает новые термоциклеры для ПЦР Swift™ со встроенным компьютером для автономной работы от ввода данных в программу ПЦР, мониторинга и анализа.