Процесс термического цикла

ПЦР, или полимеразная цепная реакция, — это распространенный метод, используемый в исследовательских лабораториях, занимающихся ДНК, позволяющий исследователям и техническим специалистам реплицировать один образец ДНК миллионы раз.Это, конечно, способствует эффективному анализу и исследованию отдельных участков ДНК.Этот метод был разработан в 1980-х годах, но за этот короткий промежуток времени он уже способствовал множеству исследовательских достижений.

ПЦР была разработана в 1983 году американским биохимиком Кэри Маллисом, который позже был удостоен Нобелевской премии за усовершенствования и открытия, сделанные им в области химии.ПЦР позволяет сделать миллионы копий одного небольшого образца ДНК.Медицинские и биологические исследователи используют ПЦР для идентификации конкретных генов, выявления патогенов и создания профиля ДНК для судебно-медицинской экспертизы.

Для эффективного выполнения метода ПЦР требуется несколько основных ингредиентов.Во-первых, и это самое главное, вам нужен образец ДНК, который будет скопирован.Далее идет праймер, который фактически инициирует процесс ПЦР.Эти праймеры представляют собой короткие участки ДНК, которые связываются с каждой стороной реплицируемого образца ДНК.Для проведения эффективной реакции вам также понадобятся основания нуклеотидов ДНК, фермент Taq-полимераза и буфер.

Процесс термического цикла

Фактический процесс ПЦР проводится посредством термоциклирования — процесса нагрева и охлаждения, который создает условия, необходимые для репликации ДНК.Термоциклирование для ПЦР включает три фазы: денатурацию, отжиг и удлинение.

·Денатурация: Первым шагом в процессе термоциклирования для ПЦР является денатурация.При этом образец ДНК нагревается до такой степени, что двухцепочечный образец отделяется, образуя две отдельные нити ДНК.

· Отжиг: После начального нагревания для денатурации температура снижается, что дает праймерам ДНК возможность прикрепить образец ДНК посредством отжига.

·Продление: Расширение предполагает еще одно повышение температуры.Это окончательное повышение температуры позволяет ферменту Taq-полимеразе фактически реплицировать матричную ДНК.

Каждая из этих трех фаз процесса термоциклирования повторяется от 20 до 40 раз.Каждый последующий цикл приводит к удвоению копий ДНК.Продолжительность времени, затраченного на термоциклирование, будет варьироваться в зависимости от объема образца и конкретного используемого оборудования, но обычно это занимает от одного до четырех часов.После термоциклирования можно провести электрофорез для анализа образцов и проведения дальнейших исследований.

Успешный термоциклинг начинается с правильного оборудования, такого как термоциклер BIOBASE PCR.Мы предлагаем широкий ассортимент продуктов для термоциклирования, которые разработаны с учетом качества и эффективности.